药学论文_以CD54为评价指标的THP-1细胞光致敏
2022/01/10文章目录
1 材料
1.1 药物和主要试剂
1.2 主要仪器
1.3 细胞培养
2 方法
2.1 辐照强度、时间和检测时间点的选择
2.2 受试物浓度
2.3 受试物与THP-1细胞共同孵育
2.4 光照或避光处理
2.5 预照射处理
2.6 光照后细胞换液培养
2.7 CD54和CD86的检测
2.8 数据分析
3 结果
3.1 各种类型受试物对THP-1细胞CD54和CD86表达的影响
3.1.1 光致敏剂模型THP-1细胞CD54和CD86的表达
3.1.2 光刺激剂模型THP-1细胞CD54和CD86的表达
3.1.3 皮肤致敏剂模型THP-1细胞CD54和CD86的表达
3.1.4 皮肤刺激剂模型THP-1细胞CD54和CD86的表达
3.1.5 阴性受试物与THP-1细胞孵育后CD54和CD86的表达
3.2 各类受试物模型THP-1细胞CD54的RFI
3.3 评价指标和判定标准的确定
3.4 以CD54为评价指标的光致敏体外评价方法的验证
4 讨论
文章摘要:目的确定并验证以细胞表面标志物CD54作为评价指标的光致敏体外评价方法。方法将THP-1细胞与多种光致敏剂、光刺激剂、皮肤致敏剂、皮肤刺激剂和阴性受试物分别孵育,在光照射或避光处理后,用流式细胞仪测定细胞表面标志物CD54和CD86的表达水平并统计分析,进一步确定具体的评价指标,并对该方法的准确性、特异性、灵敏度、重复性进行验证。结果 19种光致敏剂中有15种引起照射组THP-1细胞表达CD54的平均荧光强度（MFI）较非照射组显著增加（P<0.05、0.01）,且照射组细胞表达CD54的相对荧光强度（RFI）值均在1.5以上。光刺激剂经光照射后也可引起细胞表达CD54的MFI显著增加（P<0.01）,但经过预照射处理后,CD54的表达水平较直接照射组显著下降（P<0.01）。未经光照射条件下,皮肤致敏剂即可引起THP-1细胞表达CD54和CD86的MFI比对照组显著增加（P<0.01）,光照后CD54的表达反而略有下降。在光照和避光条件下,皮肤刺激剂、阴性受试物（乳酸）均未引起细胞表达CD54或CD86的显著性变化。以CD54为评价指标的THP-1细胞光致敏评价方法检测光致敏剂的准确性、特异性和灵敏度分别是85.2%、100%和78.9%,具有良好的重复性。结论确定了THP-1细胞光致敏评价方法的细胞表面标志物评价指标为CD54,判定标准为:（1）光照后THP-1细胞表达CD54的MFI较照射前显著性增加;（2）光照后THP-1细胞表达CD54的RFI≥1.5;（3）当上述条件均满足时,对受试物进行预照射处理,结果仍然满足前2条标准。
文章关键词:
论文分类号:R965.3
